膜脂排列順序(Lipid order)被認為和細胞膜的物理特性 (例如:膜流動性、膜張力和膜曲率)高度相關。科研人員透過觀察細胞膜脂排列順序來了解細胞膜的各種功能,通常以脂質堆積程度來描述。例如,僅含有飽和脂質的磷脂會產生高堆積和厚的脂質雙層,稱為液體有序相 (Lo)。另一方面,含有不飽和脂質的磷脂具有彎曲結構,形成低堆積和薄膜結構,稱為液體無序相 (Ld)。雖然膜組成模型可以輕鬆討論膜脂排列順序 (Lo/Ld),但實際細胞具有多種類型的脂質,且會受到固醇類和膜蛋白的影響,形成非常複雜的膜脂排列順序。
為了測量膜脂排列順序,科研人員發展了一些溶劑化顯色 (solvatochromic)染料,這些染料會根據其溶劑極性而改變螢光強度和顏色,而科研人員充分利用此特性來感測膜脂排列順序所造成的極性變化。其中Laurdan是最著名的膜脂排列順序成像染料,然而,傳統染料需要紫外光激發並且表現出較低的光穩定性,因此 Laurdan 不適合活細胞成像。
至此,由高知大學Yosuke Niko 博士和斯特拉斯堡大學Andrey S. Klymchenko 博士開發的新型溶劑化顯色染料: LipiORDER ,其激發波長約400 nm左右,低能量激發與活細胞成像高度相容。且LipiORDER 在細胞膜上也具有較高的光穩定性和化學穩定性。基於這些特性,可利用 LipiORDER 來感測膜脂排列順序,以下統整此產品特點:
- LipiORDER 是一種基於芘 (pyren)的溶劑化顯色螢光染料,它會根據溶劑環境改變螢光特性。在甲苯等低極性溶劑中,LipiORDER 呈現綠色螢光。另一方面,在高極性溶劑 (例如 DMSO 和甲醇)中,該染料的顏色會變成橙色或紅色。
- LipiORDER 是一種高度疏水性化合物,可快速積聚在各種生物膜中。結合前述兩個特點,LipiORDER可以感測脂雙層中的局部環境。一般來說,Lo是高堆積脂雙層,呈現較低的極性,而Ld是稀疏堆積脂雙層,呈現高極性。根據脂質排序衍生的脂雙層的極性 (圖 1),LipiORDER 將改變螢光顏色,從Lo膜上的綠色變為Ld膜上的紅色 (圖 2)。
- 螢光比率 (FR/FG)與脂質排列順序 (Lo和Ld)呈高度相關。實際上,在鞘磷脂/膽固醇(SM/Chol,model Lo)脂質體 (liposome)中,LipiORDER 發出綠色螢光 (F575/F510比率低),而在1,2-二油酰-sn-葡萄糖-3-磷酸膽鹼 (DOPC,model Ld)脂質體中,發出紅色螢光 (FR/FG比率高)。在中間模型DOPC/Chol中,試劑顯示黃色至橙色。
小編幫大家整理 LipiORDER 的優點:
低能量激發且具有較高的光穩定性和化學穩定性,適合活細胞成像
提供有關細胞膜中脂質分子的分佈訊息,有助於理解細胞膜異質性的形成機制及其對細胞功能的影響
可於不同生理條件下,追蹤細胞膜中脂質的動態變化
可以用來研究藥物如何影響膜的秩序性和動態,從而幫助改善藥物設計
這麼好用的試劑,趕快揪團來下單~
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