我們在先前【實驗品管系列-環境監控】文章中，有提到許多產業依其製程需求，須於「潔淨室」(Cleanroom，即無塵室)環境中運作。本文則以微生物監測方法當中的「落菌法」(Settle plate test)作介紹。

        「潔淨室」的空氣落菌數量監測與控管，目的在於確認室內的高效率空氣微粒子過濾網(High-Efficiency Particulate Air, HEPA)過濾效能，隔絕潛在的有害微生物汙染，以確保產品品質及環境衛生。

「落菌法」：用於評定在一設定時間內，可能沉落在產品或物品表面上微生物數量的一種直接方法。

        潔淨室內落菌平板(培養皿)的採樣點，是在管制環境必須監測微生物的位置，以及可能遭受微生物污染的地方。應放置於微量空氣移動區(即“靜區”)、氣流聚集區，或是極度亂流區，這些區域通常是在靠近門的位置、傳遞口、回風口、潔淨室內HEPA 之間及牆角落。而潔淨室內人員活動或執行特定操作的區域也須監測，例如：靠近工作台處、已移入潔淨室的托盤、正待轉移入的潔淨空氣設備內。 

        落菌法之執行方式：

1.打開內含瓊脂培養基之培養皿，暴露在一設定時間讓負載微生物之粒子沉落在瓊脂培養基上。(避免讓手觸摸到培養基，並盡可能不要有物體跨越暴露的培養皿上空)。

2.培養皿直徑約90 mm (面積大約為64 cm2)，附著粒子之微生物數量是以菌落形成單位(Colony-forming unit, CFU)計算。

3.嚴格控制的區域應以“最差狀況”的條件來監測，讓培養皿完全暴露在整個工作流程的運轉中(機器設備正在製程中運轉、工作人員正在執行日常作業)，培養之前應紀錄暴露時間。

4.培養皿於培養後，依潔淨室之潔淨等級所設定的空氣測試參考標準，執行結果的判讀。

        培養基之注意事項：

運用於環境監測的微生物培養基必須確認它們對細菌、真菌(例如：酵母菌與黴菌)的捕獲能力，以及適當的培養溫度與時間(在30°C到35°C培養48至72小時可以得到好氧性微生物之總生菌數；在20°C到25°C培養5至7天，一般可以得到酵母菌與黴菌的總生菌數)。

        落菌法之限制：

1.若要檢測低污染程度的空氣懸浮微生物，除非是長時間的暴露，否則落菌法靈敏度不高。

2.培養皿在暴露過程中，若時間過長，培養基表面會有乾涸的問題，需要先確認所使用的培養皿在長時間暴露後，仍能維持微生物生長。

        落菌法缺少定量空氣監測的價值(因為只有沉落在瓊脂培養基上的微生物可以被監測得到)，但在關鍵區域卻能作為定性指示劑，故可將培養皿定點放在產品高風險污染的位置。

        另外，當其他形式的空氣採樣器(例如：離心採樣器、單篩瓊脂採樣器)所得到的結果，與這種被動式空氣採樣方式(即落菌法)所得到的數據並用時，是非常有用的指標。

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