外泌體是一種由細胞自行生成的細胞外囊泡 (Extracellular vesicles, EV)，會被細胞釋出，外圈結構是細胞膜，膜內帶有一些物質。外泌體存在於多種生物體液中，如血液、尿液和唾液。它們在多種生理和病理過程中扮演著重要的角色。由於外泌體能夠在細胞間轉移蛋白質、脂質和DNA、RNA等遺傳物質，所以在再生醫學、癌症研究、生技製藥等領域的生物醫學研究和臨床應用中受到極大關注。

        外泌體萃取方法主要有差速超高速離心法、密度梯度離心法、粒徑篩析層析法、沉澱法、免疫親和法、超濾法和切向流過濾法等。選擇合適的外泌體萃取方法，需要考慮樣品類型、純度要求、成本、效率等因素。

1. 差速超高速離心法 (Differential Ultracentrifugation, DUC): 基於外泌體與其他細胞碎片、蛋白質等大小和密度的差異而進行分離的方法, 逐步增加離心速度，依次去除細胞，細胞碎片，凋亡小體，最終沉澱出外泌體。

優點：方法簡單，成本較低。

缺點：耗時較長，可能無法完全去除其他細胞外囊泡和蛋白質聚合物。

2. 密度梯度離心法 (Density Gradient Ultracentrifugation, DGUC): DUC的進化版。離心時不同物質有不同的密度梯度，使用密度梯度介質 (如蔗糖或碘克沙醇)，利用外泌體的浮力密度進行分離，從而提高純度。

優點：相較於差速超高速離心，純度更高。

缺點：過程較複雜，需要更多時間和專業設備。

3. 粒徑篩析層析法 (Size Exclusion Chromatography, SEC): 利用多孔性基質的層析管柱做為固定相，借由分子的大小及形狀, 進行分離的方法。

優點：對外泌體溫和，可以保留其結構和活性。

缺點：可能需要進一步的純化步驟來提高純度。

4. 沉澱法 (Precipitation): 利用聚合物 (如PEG)將外泌體從溶液中沉澱出來。

優點：簡單快捷。

缺點：純度較低，可能存在其他污染物共沉澱。

5. 免疫親和法 (Immune Affinity, IA): 利用抗原，抗體特異性結合的原理，來辨識EV表面的膜蛋白標記物 (如CD9, CD63, SD81, CD82等) 進行特異性捕獲，進而分離EV的方法。

優點：純度高，特異性強。

缺點：成本較高，產量較低。

6. 超過濾法 (Ultrafiltration, UF): 利用濾膜孔徑的大小，透過離心驅動的超濾離心管來進行分離。

優點：可根據需要選擇不同的濾膜，適用於多種樣品。

缺點：過濾過程中，外泌體可能受到損害。

7. 切向流過濾法 (Tangential Flow Filtration, TFF): 樣品以切向方式流過濾膜，利用外泌體的大小和形狀進行分離。

優點：可連續操作，處理量大，適合大體積樣品。

缺點：需要一定的設備和操作經驗。

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