環境DNA (environmental DNA, eDNA)指的是存在於水、土壤、空氣等環境樣本中的DNA,其來源包括:生物脫落的細胞 (組織、黏液、毛髮等)、生物排泄物 (尿液、糞便)、死亡生物體殘留物、環境中的微生物等。透過採集水、土壤、空氣或沉積物等環境樣本的DNA,即可分析、推測該棲地中生物的存在狀況及多樣性,不需直接捕捉或觀察生物個體。
eDNA結合次世代定序技術 (Next Generation Sequencing, NGS),近年來在生態學、環境監測與生物多樣性研究中非常重要。高通量定序技術可快速且大量定序上百萬條DNA片段,而高靈敏度的特點,可偵測極微量DNA組成。
NGS技術於eDNA應用的範疇有以下幾類:
(1) 生物多樣性監測 (Biodiversity monitoring):
NGS可同時定序樣本中大量的DNA片段,快速區分出多種生物類型 (魚類、昆蟲、真菌、細菌等)。
(2) 外來種與稀有物種偵測:
NGS能夠在eDNA中依需要檢測出特定物種,可用以偵測入侵物種或瀕危物種。
(3) 生態系功能研究:
了解微生物群落的功能基因,進而推估研究養分循環、污染降解等生態功能。
(4) 疾病與病原體監測:
在水體或土壤中的eDNA,檢測可能存在的致病菌、病毒、寄生蟲,協助公共衛生與農業防疫。
(5) 古環境重建 (Paleoenvironmental reconstruction):
透過沉積物eDNA,重建古代生態系的生物組成與氣候變遷歷史。
NGS技術於eDNA的實際應用流程如下:
1. 環境樣本採集:水、土壤、空氣或沉積物。
2. DNA萃取:純化出eDNA。
3. PCR擴增:使用通用引子 (如16S、18S、COI、ITS…)或特定物種引子。
4. NGS定序:高通量平台 (如Illumina、Oxford Nanopore、PacBio…)。
5. 生物資訊分析:序列比對、物種分類、群落結構。
6. 生態解讀:多樣性分析、外來種偵測、功能推估。
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