高通量基因克隆(Gateway Cloning)原理是λ噬菌體感染大腸桿菌時,噬菌體中attP位點和細菌基因組attB位點會發生基因重組,噬菌體DNA會重組進入細菌基因體DNA中,形成attL及attR位點並藉此在宿主體內複製來達到繁殖的目的(圖一)。
Gateway cloning分為BP反應及LR反應(圖二)。早期需先使用BP反應將目標DNA置換進doner vector形成entry clone,再經由LR反應,LR clonase將entry clone 中的目標DNA置換進destination vector,最終形成Expression clone。現在是跳過BP反應,只需將目標DNA以TA cloning或是酵切的方式置入entry clone,再經由LR反應形成Expression clone。
Gateway system優點很多:
Nanopore,Illumina長短序列機型齊全
高效率,高品質的好選擇
專業的樣品品管程序與文庫製備
專業的生物資訊分析與服務諮詢